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2020-01-05
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大足美國(guó)紐勤測(cè)試片而現(xiàn)在科學(xué)家們把人的胰島素基因送到大腸桿菌的細(xì)胞里,將編碼截短的門(mén)冬酰胺酶突變體(ansB-C),天然C肽,人IgG1鉸鏈區(qū)(hinge),額外的酸敏感二肽(DP)以及富含堿性氨基酸的8肽(KRKRKKSR)的核苷酸序列依次分別插入pET28a載體中,構(gòu)建表達(dá)載體pEDCC.在乳糖的誘導(dǎo)下,融合蛋白ansB-C-hinge-DPKRKRKKSRNGSGR-C-peptide以包涵體形式高效表達(dá).融合蛋白經(jīng)洗滌和乙醇分級(jí)沉淀純化后,通過(guò)酸水解將PKRKRKKSRNGSGR-C-peptide釋放出來(lái).C肽N端14肽用胰蛋白酶切割,通過(guò)DE52柱與C-peptide分離.結(jié)果:構(gòu)建的表達(dá)載體pEDCC序列正確,融合蛋白經(jīng)分離純化得到了高純度的重組人源胰島素原C肽.胰島素基因和大腸桿菌的遺傳物質(zhì)相結(jié)合,測(cè)試片批發(fā)人的胰島素基因在大腸桿菌的細(xì)胞里指揮著大腸桿菌生產(chǎn)出了人的胰島素。并隨著它的繁殖胰島素基因也一代代的傳了下去

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