3M檢測(cè)片操作

1.固體

以無(wú)菌操作將25 g樣品加入到225mL的稀釋液(磷酸鹽緩沖液或0.1%蛋白胨水)中，8000r/min均質(zhì)2min(或放入無(wú)菌均質(zhì)袋中，用均質(zhì)器拍打2min),制成1:10樣品勻液。

2.液體

取25 mL樣品原液，放入裝有225 mL,稀釋液的無(wú)菌玻璃瓶中，以30cm幅度，7s內(nèi)振搖25次，制成1:10樣品勻液。將上述勻液做10倍系列梯度稀釋?zhuān)鶕?jù)樣品的污染程度，選擇適宜的2個(gè)-3個(gè)連續(xù)稀釋度，每個(gè)稀釋度接種2張測(cè)試片。

將PYM檢驗(yàn)測(cè)試片放在平坦的實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，揭開(kāi)上層膜，用移液器將1ml樣液加到測(cè)試片的中央，輕輕覆蓋上層膜，用壓板平穩(wěn)壓下，使其均勻覆蓋在測(cè)試片的圓形培養(yǎng)面積上，拿起壓板，靜置至少1min,使培養(yǎng)基凝固。

將測(cè)試片的透明面朝上放置于培養(yǎng)箱內(nèi)，堆疊不能超過(guò)20片，在25℃-28℃下培養(yǎng)3d-5d。

培養(yǎng)3d后觀察計(jì)數(shù)，如果5d后，測(cè)試片上的菌生長(zhǎng)過(guò)快，出現(xiàn)邊緣模糊的菌落，就用3d的計(jì)數(shù)結(jié)果作為估計(jì)菌落數(shù)。在PYM測(cè)試片上，顏色均勻一致，灰白色到藍(lán)綠色或粉紅色，沒(méi)有暗色中心，邊界明顯的小型隆起菌落計(jì)為酵母菌。顏色多樣(棕色、米色、橙色、藍(lán)綠色等)、中心顏色深暗的大型或小型扁平擴(kuò)散菌落計(jì)為霉菌。