試劑盒檢測(cè)因其靈敏度高、特異性好而被廣泛應(yīng)用于臨床,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)檢測(cè)結(jié)果影響很大。如果不注意,可能會(huì)導(dǎo)致顯色不完全,花板等結(jié)果。檢測(cè)試劑盒包含以下成分:包被有抗原或抗體的固體載體(免疫吸附劑);酶的標(biāo)記抗原或抗體(結(jié)合物);酶的底物;陰性對(duì)照品和陽(yáng)性對(duì)照品(定性測(cè)定)、對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照血清(定量測(cè)定);酶聯(lián)物質(zhì)(結(jié)合物)和標(biāo)本的稀釋液;清潔溶液;酶反應(yīng)終止溶液。檢測(cè)中有三種得要的試劑:免疫吸附劑、結(jié)合物和酶底物。
1.選擇試劑
選擇好的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
二,添加樣本
可能的原因:
1)如果血清或血漿樣本沒(méi)有很好地分離,將添加樣本;2)人工操作時(shí),加樣過(guò)多,導(dǎo)致放入培養(yǎng)箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(尤其是室內(nèi)溫度較高時(shí));3)加入標(biāo)本,加入酶試劑時(shí),酶從孔中溢出。
解決方案:
1)標(biāo)本為血清:血液自然保存1-2小時(shí),然后以3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本是血漿:得要使用含有抗凝血?jiǎng)┑难簶?biāo)本采集管。采血后,得要立即將采血管倒轉(zhuǎn)并混合5-10次。靜置一段時(shí)間后,以3000轉(zhuǎn)/分的速度離心15分鐘;如果是幾天內(nèi)檢測(cè)出來(lái)的,可以放在2-8的冰箱里;如果要儲(chǔ)存,可以放在-20的冰箱里。
2)樣品加入后及時(shí)放入培養(yǎng)箱。
3)加入酶試劑后,用吸水紙輕輕擦拭并吸干酶標(biāo)板表面。
4)如果采用AT或其他全自動(dòng)進(jìn)樣,選擇FAME或其他后處理儀器添加酶試劑。
5)標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。