3M檢測片針對細胞培養(yǎng)和消化

細胞培養(yǎng)大致分為兩種，一種是懸浮細胞培養(yǎng)，一種是貼壁細胞培養(yǎng)，無論是哪種方式，進行細胞培養(yǎng)時一般會通過以下幾個步驟：

細胞準備—細胞傳代—細胞培養(yǎng)基配置—細胞接種—培養(yǎng)條件控制—細胞觀察和培養(yǎng)—細胞實驗—細胞凍存

當然以上只是細胞培養(yǎng)過程的一個基本框架，實際操作可能會因細胞類型、實驗要求和實驗室的標準操作規(guī)程而有所不同。

細胞消化是研發(fā)人員在操作細胞培養(yǎng)過程中一個步驟，一般細胞長至80%-90%密度則需要傳代消化，貼壁細胞傳代前，需要把細胞用消化試劑從培養(yǎng)容器表面解離出來，細胞得以分離成單個懸液傳代至含新鮮培養(yǎng)基的新容器內(nèi)；常見的細胞消化方法有三種：酶消化法、離子螯合法、機械消化法。其中，酶消化法是用得很多的，主要使用胰蛋白酶，一般濃度在0.25-0.5%，消化的時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化。一般來說，0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在37℃條件下消化1-5分鐘就足夠了。需要注意的是，Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質(zhì)可降低胰酶的活性，因此不含Ca2+、Mg2+，含EDTA的胰酶活性更高; 可用含血清的培養(yǎng)基終止胰酶消化。

 胰蛋白酶大致可以分為兩種，一種是傳統(tǒng)使用的動物源性的胰蛋白酶，主要提取自?；蜇i的胰腺組織，其缺點是會帶來病毒污染的風險；另一種則是非動物源性胰酶，即利用基因重組技術(shù)生產(chǎn)的重組胰蛋白酶。重組胰蛋白酶具有許多潛在用途，包括用于生產(chǎn)藥品、用作研究工具以及生物技術(shù)應(yīng)用，例如蛋白類藥物的生產(chǎn)、細胞的分離、疫苗生產(chǎn)以及用于細胞分析的組織樣本的制備，同時解決了傳統(tǒng)使用的豬或牛胰蛋白酶可能帶來病毒污染的風險。我國2020版藥典一次收錄了無動物源性重組胰蛋白酶的質(zhì)量標準?？傮w而言，重組胰蛋白酶在生物藥及科研領(lǐng)域是不可缺少的工具酶。