3M測試片是美國3M公司研發(fā)的一種快速測試片。3M測試片相比傳統(tǒng)測試方法,大大的縮短了檢測工作時間,省略了培養(yǎng)基配制、高壓滅菌、平板傾注等繁瑣步驟,工作效率大幅提高,并且由于品質(zhì)的穩(wěn)定均一,克服了傳統(tǒng)測試方法存在的使用培養(yǎng)基批次不同、配置條件不同、配置人員不同而導致的差異性。3M快速測試方法得到了包括AOAC在內(nèi)的多個國際權(quán)威機構(gòu)的認證,在全球許多國家已獲官方機構(gòu)的正式批準,從而可以確保檢測結(jié)果的可靠性和世界各地的廣泛認可。
3M測試片包括菌落總數(shù)、大腸菌群、大腸菌群/大腸桿菌、金黃色葡萄球菌霉菌和酵母菌、環(huán)境李斯特等很多種類。
1.操作方法
①未開封時,置于≤8℃冷藏,注意外包裝上的保存期限,打開包裝時,應(yīng)在室溫條件下。已開封的,應(yīng)用壓條或膠帶封口后,置于室溫,一個月內(nèi)用完。
②稱取樣品置于無菌均質(zhì)袋或均質(zhì)杯中,加入無菌稀釋液攪拌或均質(zhì)樣品,并用稀鹽酸或稀氫氧化鈉調(diào)pH至6.5~7.2。
注意:無菌稀釋液不可使用含有檸檬酸鹽、酸性亞硫酸鹽或硫代硫酸鹽的緩沖液,這些稀釋液會抑制細菌的生長。
③將測試片置于平坦表面處,保持水平,揭開上層膜,移液器或滴管吸1ml樣液垂直滴加在測試片的正中央。然后將上層膜慢慢落下,盡量不要出現(xiàn)氣泡,切勿向下滾動上層膜。
④將壓板的圓形內(nèi)凹面朝下,放置在上層膜的正中央,然后輕輕壓下,使樣液均勻覆蓋于圓形的培養(yǎng)基面積上,切不可扭轉(zhuǎn)壓板。
⑤拿起壓板,靜置1min以上等待培養(yǎng)基凝固。然后測試片的透明面朝上,可疊放20片,置于36℃培養(yǎng)48小時,并保持培養(yǎng)箱的濕度。
2.判讀方法
①菌落總數(shù)測試片內(nèi),含有一種紅色指示染劑,可以使菌落呈現(xiàn)紅色便于計數(shù),計算所有紅色菌落,不論大小及顏色深淺。
②測試片菌落計數(shù)的適宜計數(shù)范圍是25~250。
③測試片的計數(shù)面積約為20cm2。每一個黃色方框的面積是1cm2。當菌落總數(shù)超過250個時,為了估計菌落數(shù),可以選擇其中一個或幾個有代表性的小方框(1cm2)。計算平均菌落數(shù),然后再乘以20可得到測試片上的菌落數(shù)。
④當測試片上的菌落太多而無法進行計數(shù)時,記錄為“TNTC”。
⑤有很高數(shù)量的菌落,使整個生長區(qū)域變成粉色,或僅僅在生長邊緣區(qū)域觀察到單個菌落,記錄為“TNTC”。
⑥有很高的菌落數(shù)量,并且有時菌落會出現(xiàn)分布不均勻的情況,記錄為“TNTC”。
⑦可以看到直徑較大的菌落,并且可以計數(shù),但是仔細觀察時,會發(fā)現(xiàn)非常密集非常細小的菌落分布在計數(shù)區(qū)域內(nèi),此時記錄為“TNTC”。
⑧很少數(shù)量的菌種,會將測試片上的培養(yǎng)基液化,在計數(shù)區(qū)域內(nèi)出現(xiàn)一個粉紅色的液化區(qū),此時不要記錄液化區(qū)內(nèi)的紅點,應(yīng)選擇沒有被液化區(qū)域內(nèi)的菌落進行計數(shù),選取沒有液化部分的幾個有代表性的小方格(1cm2)。計算平均菌落數(shù),然后乘以20。得到結(jié)果。
⑨注意和樣品殘渣顆粒進行區(qū)。有些樣品中會含有一些紅色的殘渣顆粒,菌落應(yīng)該是紅色規(guī)則的圓形,而顆粒的形狀是不規(guī)則的。如果樣品以紅色顆粒為主(比如辣椒粉),這類樣品的菌落總數(shù)檢測,不宜采用3M菌落總數(shù)測試片。