無菌操作基本技術(shù)
無菌操作技術(shù)不僅在微生物學(xué)研究和應(yīng)用上起著舉足輕重的作用，在許多生物技術(shù)中也被廣泛應(yīng)用，例如轉(zhuǎn)基因技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)等。
無菌室，微生物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)專辟的一個(gè)小房間，室外設(shè)一個(gè)緩沖間，緩沖間的門和無菌室的門不要朝向同一方向，以免氣流帶進(jìn)雜菌。無菌室和緩沖間都必須密閉，無菌室內(nèi)的地面、墻壁必須平整，不易藏污納垢、便于清洗，室內(nèi)裝備的換氣設(shè)備必須有空氣過濾裝置。工作臺(tái)的臺(tái)面應(yīng)該處于水平狀態(tài)，無菌室和緩沖間都裝有紫外線燈（距離工作臺(tái)面1米），工作人員進(jìn)入無菌室應(yīng)穿戴滅過菌的服裝、帽子。
超凈臺(tái)，主要功能是利用空氣層流裝置排除工作臺(tái)面上部包括微生物在內(nèi)的各種微小塵埃，通過電動(dòng)裝置使空氣通過高效過濾器具后進(jìn)入工作臺(tái)面，使臺(tái)面始終保持在流動(dòng)無菌空氣控制之下。在條件較困難的地方，也可以用木制無菌箱代替超凈臺(tái)（正面開有兩個(gè)洞，不操作時(shí)用推拉式小門擋住，操作時(shí)可以將雙臂伸進(jìn)去；正面上部裝有玻璃，便于在內(nèi)部操作，箱內(nèi)部裝有紫外線燈，從側(cè)面小門可以放進(jìn)去器具和菌種、細(xì)胞株等）。
微生物的培養(yǎng)
在微生物的培養(yǎng)過程中，要保持培養(yǎng)物純凈性；培養(yǎng)微生物的要領(lǐng)，是為所需要的微生物提供良好的生存環(huán)境，同時(shí)阻止或抑制其他微生物的生長(zhǎng)。
?。ㄒ唬┡囵B(yǎng)基
1.認(rèn)識(shí)培養(yǎng)基的基本組成成分，從生物體構(gòu)成的基本元素這一角度理解培養(yǎng)基中為什么都需要具備這些基本成分。
2.培養(yǎng)基的用途和種類：液體和固體兩大類。
3.不同的微生物往往需要采用不同的培養(yǎng)基配方；盡管培養(yǎng)基的配方各不相同，但是其基本成分都包括水、碳源、氮源和無機(jī)鹽。
4.培養(yǎng)基是否合格（無菌試驗(yàn)）：培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1～2d后無菌落生長(zhǎng)（液體不變渾濁），說明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則需要重新制備。
?。ǘo菌技術(shù)
1.無菌技術(shù)的概念：無菌操作泛指在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止雜菌污染的方法。日常的生活環(huán)境中，每時(shí)每刻每處都存在著微生物，任何一個(gè)不經(jīng)意的動(dòng)作都可能將某種微生物引入到培養(yǎng)物中。在具備無菌環(huán)境和獲得無菌材料后，還要始終保持無菌狀態(tài)，才能對(duì)某種特定的已知微生物進(jìn)行研究或利用它們的功能，否則外界的各種微生物很容易混入。外界不相干的微生物混入的現(xiàn)象，在微生物學(xué)叫做污染雜菌。防止污染是微生物學(xué)工作中十分關(guān)鍵的技術(shù)：徹底滅菌和防止污染是無菌技術(shù)的兩個(gè)方面。此外，要有效避免操作者自身被微生物感染，還要防止所研究的微生物，特別是致病微生物或經(jīng)過基因工程改造了的本來自然界不存在的微生物從我們的實(shí)驗(yàn)容器中逃逸到外界環(huán)境中去（生物安全）。無菌操作非常重要，無論是倒平板、平板劃線操作，還是平板稀釋涂布法，其操作中的每一步都需要做到“無菌”，只有熟練、規(guī)范地進(jìn)行無菌操作，才可能成功地培養(yǎng)微生物。
2.消毒與滅菌的概念：
（1）培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿（需要滅菌）
?。?）玻棒、試管、燒瓶和吸管（需要滅菌）
?。?）實(shí)驗(yàn)操作者的雙手（需要消毒）
（4）接種環(huán)、針、涂布棒：灼燒滅菌（外焰）。
