一.標(biāo)準(zhǔn)菌株:
官方菌種保藏機(jī)構(gòu)購(gòu)買(mǎi)的0代菌株為標(biāo)準(zhǔn)菌株,根據(jù)菌株的特性至少定義到屬或種的水平。我們經(jīng)常使用的標(biāo)準(zhǔn)菌株來(lái)自?xún)蓚€(gè)主要的培養(yǎng)物保藏中心:
一個(gè)是藥品生物制品檢定所醫(yī)學(xué)培養(yǎng)物保藏中心(CMCC),提供凍干菌種(0代)和保存在凍存管中的0代黑曲霉孢子懸液菌種。
Cm (b)代表細(xì)菌。
CMCC(F)代表真菌(菌類(lèi))
二是美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(ATCC),ATCC菌株需要相應(yīng)的文件證明ATCC菌株等同于CMCC菌株。需要注意的是,從省市藥檢所購(gòu)買(mǎi)的標(biāo)準(zhǔn)菌株不是0代,需要問(wèn)購(gòu)買(mǎi)的是哪代菌株。
二、標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)存菌株:
標(biāo)準(zhǔn)菌株是通過(guò)適當(dāng)?shù)姆椒ɑ謴?fù)、復(fù)壯和保存后的標(biāo)準(zhǔn)原種菌株。一般標(biāo)準(zhǔn)品系傳代1-2次。
三。工作菌株:
標(biāo)準(zhǔn)原種傳代培養(yǎng)得到的菌株為工作菌株;測(cè)試中常用的應(yīng)變是工作應(yīng)變。
1.方法
飲用水:直接在培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。
用水稀釋成:然后倒培養(yǎng)皿進(jìn)行培養(yǎng)(每次稀釋倒兩個(gè)培養(yǎng)皿)。
取1ml于滅菌培養(yǎng)皿中,加入約45融化的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基約15ml,37左右(輕輕)均勻旋轉(zhuǎn)24h。
2.菌落數(shù)
一般用肉眼觀察,用鋼筆或蠟筆和放大鏡檢查是否有缺失的小菌落。
3.計(jì)數(shù)方法
1)平板菌落數(shù)的選擇
兩個(gè)平行的培養(yǎng)皿,計(jì)數(shù)沒(méi)有片狀菌落生長(zhǎng)的平板。
2)稀釋的選擇
選擇平均菌落數(shù)在30和300之間的稀釋度。