ATCC菌株是從事微生物學(xué)和生命科學(xué)研究的基本材料。在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,診斷產(chǎn)品的制備、幼苗的生產(chǎn)和微生物致病性的研究。將含有1滴細(xì)胞懸浮液的管子放入含有氫氧化鉀或五氧化二磷吸水劑的大型試管中,用真空泵泵至1.3帕?xí)r密封保存大型試管。這是一種干燥的保存方法,可以降低細(xì)胞死亡率,緩慢脫水,適用于各種細(xì)菌和真菌。
無菌安瓿瓶每0.1~0.2毫升注入細(xì)胞懸浮液,在-40℃預(yù)凍1小時,然后在-20~30℃真空度為13.3帕的情況下脫水。脫水后,安瓿瓶外溫度可逐漸升至25℃。脫水后,樣品的含水量應(yīng)低于3%。之后,將安瓿瓶保持1.3帕的真空度,用火焰溶解,保存10℃。為了防止ATCC菌株細(xì)胞在凍結(jié)脫水過程中受損或死亡,應(yīng)使用保護(hù)劑制備細(xì)胞懸浮液。保護(hù)劑包括脫脂牛奶、血清、10%蔗糖或葡萄糖溶液等。然而,這種方法的功能是通過核細(xì)胞。
使用甘油或二甲亞(DMSO)將細(xì)胞懸浮液作為保護(hù)劑制備,放入無菌安瓿中,每管0.2毫升,預(yù)凍至-40℃,控制溫度下降率為1℃/分鐘,然后將ATCC菌株立即放入液氮生物儲罐中保存氣相(-150℃)?;謴?fù)培養(yǎng)時,直接放入38℃的水浴中解凍5~10分鐘,然后種植在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基中。這是根據(jù)所有生化反應(yīng)停止在-130℃以下,微生物無法進(jìn)行代謝活動而設(shè)計的冷凍方法。為了避免冷凍、凍傷和細(xì)胞中形成大量冰晶,使用保護(hù)劑制備快速溶解的微生物,但在控制預(yù)冷凍時使用。