1、 未開封時,冷藏于≤8℃(≤46℉),并在保存期內用完,高溫度時,凝固水可以排除,包裝物于室溫啟開。
2、 已開封的,將封口以膠帶封緊。
3、 保存再封的袋于≤25℃(≤77℉)和溫度<50%,不要冷藏已開啟的包裝袋,并于一個月內使用完。
4、 制備1:10和更大稀釋的食物樣品稀釋液,稱取或吸取食物樣品,置入適宜的無菌容器內,如均質袋、稀釋瓶、WhirlPak bag或者其他滅菌容器內.
5、 加入適量的無菌稀釋液,包括Buffered peptone Buffer(IDF phopsphate buffer ,用0.0425g/L的KH2PO4調PH7.2) 、0.1%的蛋白膠水(ISO方法6887) 、緩沖蛋白膠水(ISO方法6579) 、鹽溶液(0.85-0.90%)、bisulfite-free letheen broth或蒸餾水.但不可用含有枸櫞酸鹽bisulfite or thiosulfate的緩沖液. 因為它能抑止菌生長。
6、 攪拌或均質樣品,酸性樣品的稀釋液用INNaoH調PH6.5-7.5,對堿性樣品的稀釋液用IN HCL調PH6.5-7.5。
7、 將測試片置于平坦表面處,揭開上層膜。
8、 使用吸管將1ml樣液垂直滴加在測試片的中央處。
9、 細心將上層膜緩慢蓋下,避免有氣光泡產生,切勿使上層膜直接落下。
10、 使用壓板(平面底朝下)放置在上層膜中央處。
11、 輕輕的壓下,使樣液均勻覆蓋于圓形的培養(yǎng)面積上,切勿扭轉壓板。
12、 拿起壓板,靜置至少1分鐘以使培養(yǎng)基凝固。
13、 測試片的透明面朝上,可堆疊至20片,對有一定濕度養(yǎng)箱能保持少份損失是需要的。
14、 可目視及用標準菌落計數(shù)器或其它的照明放大鏡計數(shù),并可參考判讀卡計算菌落數(shù)。
15、 可以分離菌落作進一步鑒定,即掀起上層膜,由培養(yǎng)膠上挑取單個菌落。