在接種微生物之前,通常對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌或煮沸攪拌,均勻程度非常均勻。沒有說切開它會(huì)改變它的營養(yǎng)成分。我認(rèn)為以下幾點(diǎn)是重要原因:1。當(dāng)微生物接種在裂隙中時(shí),生長空間變小,與周圍培養(yǎng)基的接觸面積減少,物質(zhì)交換即營養(yǎng)攝入受到限制。當(dāng)細(xì)菌在狹縫中生長時(shí),氧氣可能不足,這會(huì)減緩需氧微生物的生長。3.劃痕培養(yǎng)基中的微生物會(huì)因培養(yǎng)基的溝槽而改變菌落形態(tài),不能形成正常的特征形態(tài),影響菌落形態(tài)的觀察和特征鑒定。4.在隨后的菌落生長過程中,代謝廢物在洼地中積累。
培養(yǎng)基的滅菌方法:
1.高壓蒸汽滅菌:高壓蒸汽滅菌適用于耐高溫培養(yǎng)基、接種設(shè)備和蒸餾水的滅菌。培養(yǎng)基配制過程中,混入各種雜菌,分裝后應(yīng)立即滅菌,滅菌至少在24小時(shí)內(nèi)完成。在0.105兆帕和121下滅菌通常需要15 ~ 30分鐘。消毒時(shí)間不應(yīng)過長,也不應(yīng)超過規(guī)定的壓力范圍。否則有機(jī)物質(zhì)特別是維生素會(huì)在高溫下分解,失去營養(yǎng)功能,培養(yǎng)基會(huì)變質(zhì)變色,甚至難以固化。將蒸餾水或自來水放入三角瓶中,含水量一般小于瓶子的2/3,用牛皮紙或硫酸紙包裹密封,然后放入高壓釜中滅菌,得到無菌水。滅菌后的培養(yǎng)基可在培養(yǎng)室中預(yù)培養(yǎng)3天。如果沒有污染,說明滅菌完全,可以使用。
2.過濾殺菌:一些植物生長調(diào)節(jié)劑和有機(jī)物,如IAA、GA3、ZT、CM等。受熱時(shí)容易分解,不能與培養(yǎng)基一起高溫滅菌。相反,應(yīng)該使用細(xì)菌過濾器來過濾掉雜菌。