酶可以與一抗或二抗結(jié)合，用鏈霉親和素標(biāo)記的酶也可以與用鏈霉親和素標(biāo)記的一抗結(jié)合。
此外，對試劑盒結(jié)果的檢測還包括放射性檢測、熒光檢測、化學(xué)發(fā)光或顯色檢測等。
現(xiàn)在測試的方式很多，可以根據(jù)自己的喜好來選擇。
一般檢測酶促反應(yīng)的可溶性產(chǎn)物，抗體結(jié)合相應(yīng)的酶(如常用的辣根過氧化物酶)，而反應(yīng)體系中加入相應(yīng)的底物(如3，3-二氨基聯(lián)苯胺DAB)。
這種酶促反應(yīng)產(chǎn)生特征顏色，可以用分光光度計檢測。堿性磷酸酶AP也是一種常見的酶。
免疫組化試劑盒的六大特點：
1.簡單：用簡單的一步反應(yīng)代替常規(guī)方法的五個步驟。
2.快速：用1小時代替?zhèn)鹘y(tǒng)方法的3-5小時。
3.通用性：適用于大多數(shù)一抗，不需要二抗反應(yīng)。
4.靈敏度：具有與傳統(tǒng)方法相似的靈敏度。
5.重現(xiàn)性好：試劑盒的實驗結(jié)果重現(xiàn)性好。
6.經(jīng)濟(jì)性：抗體和試劑可重復(fù)使用4-5次。
如果抗體之間有沖突或交叉反應(yīng)，就會影響整個實驗的特異性。其中，抗體來源的相容性是交叉反應(yīng)的一個因素。
雖然現(xiàn)在從動物身上買抗體比較容易，但還是要確認(rèn)是否會有交叉反應(yīng)。使用雙抗體夾心法檢測時，用于檢測的二抗得要對檢測一抗具有特異性，不能與捕獲抗體發(fā)生反應(yīng)。
