孢子分離法是ATCC菌株
ATCC菌種是從事微生物學和生命科學研究的基本材料。在醫(yī)學領域,有一套完整的菌種,如制備診斷產(chǎn)品、生產(chǎn)菌苗、研究微生物致病性、藥物抑菌試驗和藥物微生物檢測,分為母種(一級)。、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。
工業(yè)發(fā)酵中的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩,選擇具有一定能力的有用菌種。菌種分離首先是從土壤或腐生植物中收集含菌樣品,用無菌水稀釋,然后涂在適合細菌、放線菌或霉菌生長的瓊脂培養(yǎng)基平皿上,倒置在恒溫箱中,培養(yǎng)一定時間。平皿上生長的許多單一菌落(單一微生物的集落)分離后分離成各種純菌株,簡稱純菌株,移植到試管斜面培養(yǎng)基上,放入4℃冰箱備用。
孢子分離法是ATCC菌種:
孢子分離法也可以分為以下幾種方法:
(1)褶皺涂抹法:選擇新鮮、強壯、未開傘、未破裂的子實體,洗凈后用0.1%汞或75%酒精表面滅菌2分鐘,然后與培養(yǎng)基一起放入接種箱中,經(jīng)福爾馬林熏蒸消毒12~24小時,然后按照無菌操作技術在子實體菌褶皺上涂抹接種環(huán),在培養(yǎng)基上劃線接種涂抹后帶孢子的接種環(huán)。
(2)孢子印刷采集法:將帶有細菌的載玻片、試紙或黑布放在新鮮、未開傘或未開裂的子體褶皺下。24小時后,孢子落下,形成印記(即孢子印刷)。然后,用接種環(huán)或玻璃棒蘸取孢子,在平面或斜面培養(yǎng)基上接種,恒溫培養(yǎng),得到純菌種。
(3)孢子收集器采集方法:孢子收集器由玻璃鐘罩、培養(yǎng)皿、三角架、搪瓷盤等組成。鐘罩下面是一個直徑約25厘米的搪瓷盤。盤內墊4~6層紗布,中間放一個直徑9厘米的培養(yǎng)皿。大蓋口朝下,小蓋口朝上,口朝上。然后,在上面的小培養(yǎng)皿上放一個鉛絲繞成的三角架,然后用棉塞蓋上帶孔的玻璃鐘罩。zui后,用紗布將整個孢子收集器包裹起來,放入高壓滅菌鍋或蒸籠中滅菌2小時。
孢子收集器滅菌消毒后,放入無菌室或無菌箱中。然后,用小刀切割1塊4~5厘米大小的子實體,插入收集器內的三角架頂部(如果沒有孢子收集器,也可以用培養(yǎng)皿代替)。然后在24~26℃的溫度下培養(yǎng)24小時,在培養(yǎng)皿中可以看到白色粉末,即孢子。此時,孢子收集器可以移動到接種箱中,取出培養(yǎng)皿,蓋上,在培養(yǎng)皿中加入10~20毫升無菌水,使孢子散落在這里,成為孢子懸浮液。然后,用無菌注射器或吸管將孢子懸浮液注入每個體溫度為4~24~2。