一種良好的ATCC菌株有許多要求：

　　產(chǎn)量高，產(chǎn)量高，直接降低固定投資和單一生產(chǎn)成本。

　　產(chǎn)品質(zhì)量符合要求。影響藥效和安全性的產(chǎn)品質(zhì)量。

　　穩(wěn)定性。在生產(chǎn)傳代過程中，產(chǎn)量和質(zhì)量不應(yīng)有較大變化。一般認(rèn)為60-90PDL產(chǎn)量的變化不超過30%是可以接受的。

　　與生產(chǎn)過程相容。細(xì)胞株需適用于大規(guī)模生產(chǎn)和放大。

　　5.合規(guī)性。在構(gòu)建ATCC細(xì)胞株的過程中，應(yīng)避免接觸或使用可能影響安全性的動物源成分或其他成分，以確保單克隆。(clonality)以及整個過程的完整實驗記錄。

　　無菌操作ATCC細(xì)胞株注意事項?

　　操作前要洗手，進(jìn)入超凈臺后要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦一下。

　　2.點燃酒精燈，在火焰附近操作。耐熱物品應(yīng)經(jīng)常在火焰上燃燒。金屬器械不宜燃燒太久，以免退火，冷卻后夾住組織。吸收營養(yǎng)液的器具不能再燃燒，以免燃燒形成碳膜。

　　操作動作要準(zhǔn)確、敏捷，但不能太快，以免空氣流動，增加污染機會。

　　不能用手觸摸已經(jīng)消毒器皿的工作部分，工作臺上的物品要布局合理。

　　開瓶后要盡量保持45℃的斜位。

　　吸液的吸管等不能混合使用。

　　細(xì)胞處理ATCC菌株：

　　1)復(fù)蘇細(xì)胞:在37℃水浴中快速搖晃解凍含有1毫升細(xì)胞懸液的冷凍管，加入4毫升培養(yǎng)基，混合均勻。離心4分鐘，1000RPM條件下放棄上清液，加入1-2毫升培養(yǎng)基，吹勻。然后在培養(yǎng)瓶中加入所有細(xì)胞懸液進(jìn)行一夜培養(yǎng)(或在10厘米皿中加入細(xì)胞懸液，加入約8毫升培養(yǎng)基，培養(yǎng)一夜)。第二天更換液體，檢查細(xì)胞密度。

　　細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%，就可以進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

　　對懸浮細(xì)胞而言，傳代可以參考下列方法：

　　方法一：收集細(xì)胞，在1000RPM條件下離心4分鐘，拋棄上清液，加入1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，按1-2mL細(xì)胞懸液：2到1：5的比例分為新的含有8ml培養(yǎng)基的新皿或瓶子。

　　方法二：可以選擇半數(shù)換液的方法，拋棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸掛起來，將細(xì)胞懸液按1。：2到1：3的比例分為新的含有8ml培養(yǎng)基的新皿或瓶子。

　　3)ATCC細(xì)胞株的細(xì)胞凍結(jié):當(dāng)細(xì)胞生長良好時，可以凍結(jié)細(xì)胞。懸浮細(xì)胞凍結(jié)時，應(yīng)收集細(xì)胞，在1000RPM條件下離心5分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸收)，加入一些新鮮培養(yǎng)基，加入冷凍管，在冷凍管中加入10%DMSO，然后冷凍。