無(wú)菌操作技術(shù)
1、定義
是指在執(zhí)行實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,防止一切微生物侵入機(jī)體和保持無(wú)菌物品及無(wú)菌區(qū)域不被污染的操作技術(shù)和管理方法;
無(wú)菌操作技術(shù)是微生物實(shí)驗(yàn)的基本技術(shù),是保證微生物實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確和順利完成的重要環(huán)節(jié)。
2、內(nèi)容
無(wú)菌操作技術(shù)主要包括兩方面:
1)創(chuàng)造無(wú)菌的培養(yǎng)環(huán)境。包括提供密閉的培養(yǎng)容器、培養(yǎng)容器的滅菌、培養(yǎng)基的滅菌等;
2)在操作和培養(yǎng)過(guò)程中防止一切其它微生物的侵入的措施。包括紫外線殺菌、甲醛熏蒸、超凈臺(tái)的消毒與檢測(cè)、操作工具、器皿滅菌、操作方法等。
3、無(wú)菌操作原則
1)在執(zhí)行無(wú)菌操作時(shí),必須明確物品的無(wú)菌區(qū)和非無(wú)菌區(qū),接種時(shí)必須穿工作服、戴工作帽,應(yīng)在進(jìn)無(wú)菌室前用肥皂洗手,然后用75%酒精棉球?qū)⑹植粮蓛簦?/span>
2)在操作前20~30分鐘要先啟動(dòng)超凈臺(tái)和紫外燈,進(jìn)行接種所用的吸管、平皿及培養(yǎng)基等必須經(jīng)消毒滅菌,打開包裝未使用完的器皿,不能放置后再使用,金屬用具應(yīng)高壓滅菌或用95%酒精點(diǎn)燃燒灼3次后使用。嚴(yán)禁用手直接拿無(wú)菌物品,如瓶塞等,而必須用消毒的鉗、鑷子等;
3)從包裝中取出吸管時(shí),吸管尖部不能觸及外露部位,使用吸管接種于試管或平皿時(shí),吸管尖不能觸及試管或平皿邊;
4)接種樣品、轉(zhuǎn)種細(xì)菌必須在酒精燈前操作,接種細(xì)菌或樣品時(shí),吸管從包裝中取出后及打開試管塞都要通過(guò)火焰消毒;
5)接種環(huán)或接種針在接種細(xì)菌前應(yīng)經(jīng)火焰燒灼全部金屬絲,必須時(shí)還要燒到環(huán)和針與桿的連接處;
6)吸管吸取菌液或樣品時(shí),應(yīng)用相應(yīng)的橡皮頭吸取,不得直接用口吸。傾倒平板應(yīng)在超凈臺(tái)內(nèi)操作,并且在開啟和加蓋瓶塞時(shí)需反復(fù)用酒精燈燒。