一、范圍
本方法規(guī)定了動(dòng)物源細(xì)菌（大腸桿菌、沙門氏菌、腸球菌、金黃色葡萄球菌、副豬嗜血桿菌、魏氏梭菌和偽結(jié)核棒狀桿菌）藥敏檢測(cè)試劑盒的操作方法。
二、材料
除微生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)滅菌設(shè)備外，其他設(shè)備和材料如下：
2.1 恒溫培養(yǎng)箱35±2℃
2.2 生物安全柜
2.3 濁度計(jì)或者標(biāo)準(zhǔn)比濁管
2.3 微量加樣器1uL~1000uL
2.4 吸頭（與微量加樣器匹配）
三、操作步驟
取出試劑盒，打開包裝待用。
菌液制備
將無菌棉簽用生理鹽水潤(rùn)濕后，直接取過夜培養(yǎng)皿上數(shù)個(gè)新鮮菌落，與適量無菌生理鹽水混勻。然后，用標(biāo)準(zhǔn)比濁管或者濁度計(jì)校正菌液濃度至0.5麥?zhǔn)蠁挝唬?~2×108CFU/mL）。用試劑盒中的肉湯按照使用說明書要求的倍數(shù)稀釋，混勻備用。
菌液接種
除空白對(duì)照外，其余的95孔加入制備好（用前要混勻）的菌液100?L
空白對(duì)照孔中加入100?L無菌肉湯。蓋好板蓋并記錄菌號(hào)。
孵育
將檢測(cè)板置于35℃±2℃很穩(wěn)培養(yǎng)箱中孵育16~18小時(shí)。
觀察結(jié)果
在襯有黑底板的光線下，用肉眼觀察。
先觀察陰性對(duì)照孔和陽性對(duì)照孔：陰性對(duì)照孔應(yīng)無細(xì)菌生長(zhǎng)，孔內(nèi)液體未見渾濁；陽性對(duì)照孔內(nèi)應(yīng)有細(xì)菌生長(zhǎng)所形成的圓形或者網(wǎng)狀沉淀。
如果陰性和陽性對(duì)照結(jié)果正常，繼續(xù)觀察其余孔內(nèi)細(xì)菌生長(zhǎng)情況，在無細(xì)菌生長(zhǎng)的孔內(nèi)所含低抗菌藥物濃度即為低抑菌濃度（MIC）。
四、結(jié)果記錄
將MIC結(jié)果記錄在敏感性檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)表中。
敏感性檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)表
?。?）G-菌（大腸桿菌、沙門氏菌和副豬嗜血桿菌）MIC
注：直接填寫檢測(cè)的MIC數(shù)值。
（2）G+菌（腸球菌、金黃色葡萄球菌和偽結(jié)核棒狀桿菌）MIC
注：直接填寫檢測(cè)的MIC數(shù)值。
（3）彎曲桿菌MIC
注：直接填寫檢測(cè)的MIC數(shù)值。
（4）腸球菌和魏氏梭菌MIC（促生長(zhǎng)抗菌藥物監(jiān)測(cè)）
注：直接填寫檢測(cè)的MIC數(shù)值。
