檢測試劑盒提供的微孔板上的微孔預包被了氯霉素抗體。標準品中的氯霉素即抗原和樣品中的抗原分別與酶標記結(jié)合物(酶標記抗原)同時競爭包被抗體上的有限結(jié)合位點，形成抗體/抗原、抗體/酶標記抗原復合物。室溫孵育，使競爭反應完全。洗滌酶標板，除去游離的反應物。加入底物，在室溫下，酶標記結(jié)合物上的辣根過氧化物酶催化底物發(fā)生顯色反應，孵育一定時間使顏色發(fā)生大變化。加入終止液使反應終止，同時反應物顏色由藍轉(zhuǎn)黃。顏色的深度與標準品/樣品中的氯霉素含量成反比，使用酶標儀在450nm波長下讀取相應的吸光度值。構(gòu)建標準曲線，計算樣品中濃度。
檢測試劑盒的注意事項：
1.由于使用96孔板進行檢測，如果細胞培養(yǎng)時間較長，一定要注意蒸發(fā)的問題。一方面，由于96孔板周圍一圈容易蒸發(fā)，可以采取棄用周圍一圈的辦法，改加PBS，水或培養(yǎng)液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方，以緩解蒸發(fā)。
2.溶液為黃色需避光保存，長時間光照會導致失效。當顏色變?yōu)榛揖G色時，請勿使用。溶解液結(jié)凍或產(chǎn)生沉淀時可以37℃水浴孵育以促進溶解，并且必須在全部溶解并混勻后使用。
3.為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
