ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定，酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒)法的基本原理是酶分子與抗體或抗抗體分子共價結(jié)合，不會改變抗體的免疫學(xué)特性，也不會影響酶的生物活性。酶標記的抗體可以與吸附在固體載體上的抗原或抗體特異性結(jié)合。滴加底物溶液后，底物中的供氫體在酶的作用下可以由無色的還原型變?yōu)橛猩难趸?，產(chǎn)生顯色反應(yīng)。
因此，是否有相應(yīng)的免疫反應(yīng)可以通過底物的顯色反應(yīng)來判斷，顯色反應(yīng)的深度與樣品中相應(yīng)抗體或抗原的量成正比。這種顯色反應(yīng)可以通過ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定，酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒)檢測器進行定量測定，從而將酶化學(xué)反應(yīng)的敏感性和抗原抗體反應(yīng)的特異性結(jié)合起來，使ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定，酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒)成為一種特異而敏感的檢測方法。
常用瓊脂擴散或免疫電泳法，使抗原和抗體形成沉淀線，用PBS沖洗1天，然后用蒸餾水浸泡1小時，再將瓊脂凝膠片浸泡在酶底物溶液中顯色，如有應(yīng)有的顯色反應(yīng)，再浸泡在生理鹽水中，顏色仍不褪色，說明偶聯(lián)物既有酶活性又有抗體活性。
好的偶聯(lián)物研制出來后，瓊擴增效價要在1:16以上。另一種測定方法是用一系列稀釋的酶標抗體，用ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定法，酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒)直接滴定。該方法不僅可以測量標記效果，還可以測定酶標抗體的濃度。
