3M菌落總數(shù)測試片

　　1.操作方法

　　①沒有開封的時候，放在≤8℃冷藏，注意外包裝上的保質(zhì)期。打開包裝時，應(yīng)在室溫下。如果已經(jīng)打開，用壓條或膠帶密封，放在室溫下，一個月內(nèi)用完。

　?、趯悠贩湃霟o菌均質(zhì)袋或均質(zhì)杯中，加入無菌稀釋劑攪拌或均質(zhì)樣品，用稀鹽酸或稀氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至6.5~7.2。

　　注：含有檸檬酸鹽、酸性亞硫酸鹽或硫代硫酸鹽的緩沖液不能用于無菌稀釋液，這會抑制細(xì)菌的生長。

　?、蹖y試片放在平坦的表面，保持水平，揭開上層膜，將1毫升樣液垂直滴入移液器或滴管中心。然后慢慢把上層膜掉下來，盡量不要有氣泡，不要把上層膜往下滾。

　?、軐喊宓膱A形內(nèi)凹面朝下，放在上膜中央，然后輕輕按壓，使樣液均勻覆蓋在圓形培養(yǎng)基面積上，切勿扭轉(zhuǎn)壓板。

　?、菽闷饓喊?，靜置1分鐘以上，等待培養(yǎng)基凝固。然后測試片的透明面朝上，*可以疊放20片，放置在36℃，培養(yǎng)48小時，保持培養(yǎng)箱的濕度。

　　2.判讀方法

　?、贌o論大小和顏色深淺，菌落總數(shù)測試片中都含有一種紅色指示染劑，能使菌落呈紅色，便于計數(shù)，計算出所有的紅色菌落。

　?、谠?5~250范圍內(nèi)，3M檢測片菌落計數(shù)合適。

　　③測試片的計數(shù)面積約為20cm2。每個黃色方框的面積為1cm2。當(dāng)菌落總數(shù)超過250時，可以選擇其中一個或幾個有代表性的小方框(1cm2)來估計菌落數(shù)。計算平均菌落數(shù)，然后乘以20得到測試片上的菌落數(shù)。

　?、苋绻麥y試片上的菌落太多而無法計數(shù)，則記錄為“TNTC”。

　　⑤菌落數(shù)量較高，使整個生長區(qū)域變成粉紅色，或者只是觀察到生長邊緣區(qū)域的單一菌落，記錄為“TNTC”。

　?、蘧鋽?shù)量較高，有時菌落分布不均勻，記錄為“TNTC”。

　　⑦可以看到直徑較大的菌落，可以計數(shù)。但是，如果你仔細(xì)觀察，你會發(fā)現(xiàn)計數(shù)區(qū)域分布著非常密集和微小的菌落，此時記錄為“TNTC”。

　　⑧少量菌種會液化測試片上的培養(yǎng)基，計數(shù)區(qū)域會出現(xiàn)粉紅色的液化區(qū)。此時，液化區(qū)域內(nèi)的紅點不應(yīng)記錄。應(yīng)選擇幾個沒有液化部分的有代表性的小方塊(1cm2)，而不是液化區(qū)域內(nèi)的菌落進(jìn)行計數(shù)。計算平均菌落數(shù)，然后乘以20。得到結(jié)果。

　?、嶙⒁鈽悠窔堅w粒的區(qū)域。有些樣品含有一些紅色殘渣顆粒，菌落應(yīng)該是紅色規(guī)則的圓形，而顆粒的形狀是不規(guī)則的。如果樣品主要是紅色顆粒(如辣椒粉)，則不應(yīng)使用3M菌落總數(shù)測試片來檢測此類樣品的菌落總數(shù)。

　　3M大腸桿菌/大腸菌群測試片

　　1.操作方法

　　操作方法與3M菌落總數(shù)測試片基本相同，只需將1毫升樣液加入中間紅色圓形區(qū)域，無需壓板，然后輕輕放下上膜，盡量不要產(chǎn)生氣泡。然后你可以輕輕轉(zhuǎn)動紙片，這樣樣液就可以均勻地分布在中間的紅色圓形區(qū)域。

　　2.判讀方法

　　大腸菌群在紙上呈現(xiàn)紅色菌落，緊貼菌落有氣泡，大腸桿菌在紙上呈現(xiàn)藍(lán)色菌落，緊貼菌落，有氣泡。這時候要注意區(qū)分只有紅色或者藍(lán)色菌落沒有氣泡的情況，或者氣泡沒有緊貼菌落，或者只有氣泡沒有菌落生長，不應(yīng)該包括在計數(shù)范圍內(nèi)。此外，還應(yīng)區(qū)分樣品殘渣和目標(biāo)菌落。