一般我們可用于MDIC96AP檢測的樣本是有多品種型的,如血清、血漿、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清或安排勻漿液等,不同類型的檢測樣本前期的處理方法是不一樣的。正確的處理樣本是確保MDIC96AP檢測的正確性和準(zhǔn)確性的一步,下面簡單介紹一下不同類型的樣本的處理方法。
總的來說,因?yàn)镸DIC96AP只能檢測可溶性蛋白的含量,所以應(yīng)確保一切樣本均為弄清的液體,沉積或懸浮物都應(yīng)離心去除。
為了確保檢測的準(zhǔn)確性,保存于-20℃或-80℃的樣本還是要在1~6個(gè)月內(nèi)檢測;4℃保存的樣本應(yīng)在1周內(nèi)進(jìn)行檢測。
其他,還應(yīng)確保樣本不含NaN3,因?yàn)镹aN3會按捺HRP的活性,然后導(dǎo)致假陰性的結(jié)果。
現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)并正式命名的細(xì)胞因子稀有十種,每種細(xì)胞均有其一起的、起首要作用的生物學(xué)活性。雖然品種繁復(fù)、發(fā)生細(xì)胞和作用細(xì)胞多樣、生物學(xué)活性廣泛、發(fā)揮作用的機(jī)制不同,但很多的細(xì)胞因子具有以下一起的特性:
1.天然細(xì)胞因子是由細(xì)胞發(fā)生的 正常的靜息或休止?fàn)顩r的細(xì)胞有必要經(jīng)過激活后才調(diào)組成和排泄細(xì)胞因子。一般是由抗原、絲裂原或其它影響物激活免疫細(xì)胞和相關(guān)細(xì)胞,6~8小時(shí)后細(xì)胞培養(yǎng)上清中即可檢測出細(xì)胞因子,于24~72小時(shí)期間細(xì)胞因子水平很高??墒怯行┘?xì)胞株不需外源影響就可以自發(fā)地排泄某些細(xì)胞因子。
2.細(xì)胞因子的發(fā)生和作用具有多向性即單一影響如抗原、絲裂原、病毒感染等可使同一種細(xì)胞排泄多種細(xì)胞因子,而一種細(xì)胞因子由多種不同類型的細(xì)胞發(fā)生可作用于多種不同類型的靶細(xì)胞。
3.細(xì)胞因子的組成和排泄過程是一種自我調(diào)控的過程一般情況下,細(xì)胞因子很少貯存,即不從前體方法貯存在細(xì)胞內(nèi),而是經(jīng)過恰當(dāng)影響后敏捷組成,一旦合面后便排泄至細(xì)胞外以發(fā)揮生物學(xué)作用,影響消失后組成亦較快地間斷并被敏捷降解。
4.為低分子量的排泄型蛋白質(zhì)常被糖基化。分子量大小不等,大多數(shù)為15~30kD,小者僅8~10kD,一般不超越80kD。
5.細(xì)胞因子需與靶細(xì)胞上的高親和力受體特異結(jié)合后才發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。
6.生物學(xué)效應(yīng)很強(qiáng) 細(xì)胞因子在pM(10-12M)水平就能發(fā)揮顯著的生物學(xué)效應(yīng)。這與細(xì)胞因子與靶細(xì)胞外表特異性受體之間親和力很高有關(guān),其解離常數(shù)在10-12~10-10M之間。
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