選擇各種實驗條件非常重要，包括：
(1)固體載體的選擇：許多物質都可以作為固體載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙烯酰胺、纖維素等。其形式可以是凹平板、試管、珠子等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。無論哪種載體，使用前都可以進行篩選：用等量的抗原包被，在相同的實驗條件下反應，觀察顯色反應是否均相，判斷其吸附性能好不好。
(2)包被抗體(或抗原)的選擇：抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時，要求純度好，PH值一般在9.0-9.6之間。吸附溫度、時間和蛋白質含量也有一定影響，一般為418 ~ 24小時。
間接法是檢測抗體zui的常用方法。其原理是利用酶標抗抗體檢測已與固相結合的被測抗體，故稱間接法。操作步驟如下：
(1)將特異性抗原與固體載體連接形成固體抗原：洗滌除去未結合的抗原和雜質。
(2)加入稀釋的待測血清：血清中的特異性抗體與抗原結合，形成固相抗原抗體復合物。洗滌后，只有特異性抗體保留在固體載體上。血清中的其他免疫球蛋白和雜質，因為不能與固體抗原結合，在洗滌過程中被洗掉。
(3)加入酶標抗抗體：與固相復合物中的抗體結合，使抗體被酶間接標記。洗滌后，固體載體上酶的量代表特異性抗體的量。例如，為了測定人對某種疾病的抗體，可以用酶標記羊抗人IgG抗體。
(4)加入底物顯色：顏色深淺代表標本中被檢測抗體的量。
