在測定過程中,3m細(xì)菌測試條的測試樣本(其中的抗體或抗原被測定)與固體載體表面的抗原或抗體反應(yīng)。通過洗滌將固體載體上形成的抗原-抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分離。然后,加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,酶標(biāo)記的抗原或抗體也通過反應(yīng)結(jié)合到固體載體上。此時(shí),固相上酶的量與樣品中待測物質(zhì)的量成正比。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物。產(chǎn)物的量與樣品中被檢測物質(zhì)的量直接相關(guān),因此可以根據(jù)顏色深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率高,間接放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達(dá)到高靈敏度。Elisa可用于確定抗原和抗體。
但影響Elisa檢測結(jié)果的因素很多,加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證,才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)勢。
幾種情況:
1.如果廠家沒有提供血清和血漿樣本專用的緩沖液,只要在待測物種的血清中加入已知濃度的待測指標(biāo)蛋白作為樣本,在PBS緩沖液中加入已知濃度的待測指標(biāo)蛋白進(jìn)行同時(shí)檢測和比較,就可以知道試劑盒是否可以直接用于測定血清和血漿樣本。
2.如果廠家沒有提供血清和血漿樣本的專用緩沖液,只是提供了通用的或統(tǒng)一的稀釋液,那么只要在待測物種的血清中加入已知濃度的待測指標(biāo)蛋白,并在廠家提供的統(tǒng)一緩沖液中加入已知濃度的待測指標(biāo)蛋白進(jìn)行同步檢測,就可以斷定試劑盒是否可以直接用于檢測血清和血漿樣本。