有各種各樣的樣品可用于測定3m微生物測試片。體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液和糞便)都可以作為標本來測定某些抗體或抗原成分。有些標本可以直接測定(如血清和尿液),有些則需要預(yù)處理(如糞便和一些分泌物)。3m的微生物試片大多以血清為樣本。血漿中除纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成分與血清相等。制備血漿樣本需要抗凝劑,而血清樣本只有在血清自然凝固、血凝塊收縮后才能獲得。除特殊情況外,在醫(yī)學(xué)檢查中使用血清作為測試樣本。在ELISA中,血漿和血清可以同等使用。血清標本可用常規(guī)方法采集,注意避免溶血。紅細胞溶解時,會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)。在以HRP為標記的ELISA中,溶血性樣品可能會增加非特異性顯色。
血清樣本應(yīng)在新鮮時進行檢測。如果有細菌污染,細菌中可能含有內(nèi)源性HRP,也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。如果放在冰箱里太久,可以聚合,間接ELISA可以加深背景。一般來說,5天以內(nèi)測定的血清標本可以放在4下,超過一周測定的需要低溫保存。冷凍血清融化后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均。應(yīng)充分混合,輕輕攪拌,以免產(chǎn)生氣泡??梢缘怪?,在混音器上應(yīng)該不會強烈震蕩?;鞚峄虺恋淼难鍢颖緫?yīng)先離心或過濾,澄清后再檢測。反復(fù)凍融會導(dǎo)致抗體效價下降,所以如果抗體檢測的血清樣本需要保存多次檢測,宜少量包裝,冰藏。保存和采集血清時,應(yīng)注意無菌操作,也可加入適當?shù)姆栏瘎?/span>