1.前增菌和二次增菌都是必不可少的過程。

食品中的沙門氏菌含量一般都很少并且會有多種細(xì)菌同時(shí)存在的情況，前增菌可以使受傷菌得到修復(fù)而增菌可以抑制一些雜菌的生長，所以用前增菌和增菌分別進(jìn)行篩選和培養(yǎng)，可以增加后期分離培養(yǎng)的檢出率。

2.分離培養(yǎng)中應(yīng)注意當(dāng)不存在典型的或可疑的沙門氏菌菌落時(shí)，按如下步驟檢驗(yàn)非典型的沙門氏菌菌落。

HE和XLD：非典型的沙門氏菌在HE和XLD瓊脂上呈黃色菌落，帶或不帶黑色中心。HE和XLD平板經(jīng)24±2小時(shí)培養(yǎng)后，沒有典型的沙門氏菌菌落，則挑取2個(gè)或更多個(gè)非典型的沙門氏菌菌落。

BS瓊脂：某些非典型菌株產(chǎn)生綠色菌落，其周圍培養(yǎng)基稍微或不呈暗色。如果BS平板培養(yǎng)24±2小時(shí)后，沒有出現(xiàn)典型菌落，則不挑取任何菌落讓平板繼續(xù)培養(yǎng)24±2小時(shí)。如果經(jīng)48±2小時(shí)培養(yǎng)后，仍沒有典型或可疑菌落出現(xiàn)，則挑取2個(gè)或更多個(gè)非典型的菌落。

3.TSI要制備成高柱斜面，有助于結(jié)果判讀，實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)先劃線再穿刺，先穿刺再劃線可能會導(dǎo)致含菌量太高。

如果產(chǎn)H2S變黑，難以觀察底層的產(chǎn)酸現(xiàn)象，并且如果產(chǎn)氣較多的話培養(yǎng)基會被頂出很高更有甚者可能會頂開試管塞。典型沙門氏菌在TSI上斜面呈紅色，底端呈黃色，有氣體產(chǎn)生，90%形成H2S，瓊脂變黑。但對于乳糖陽性的沙門氏菌斜面也呈黃色，因此不能僅僅根據(jù)三糖鐵培養(yǎng)的結(jié)果就確認(rèn)沙門氏菌。

4.目前沒有一種培養(yǎng)基能準(zhǔn)確無誤的篩選出沙門氏菌，因此必須選擇多種選擇性培養(yǎng)基同時(shí)進(jìn)行篩選。

顯色培養(yǎng)基只是綜合選擇性更強(qiáng)，實(shí)驗(yàn)人員不能只在選擇性培養(yǎng)基和TSI特征符合而沒有把關(guān)鍵的生化反應(yīng)和血清學(xué)鑒定完成的情況下就報(bào)結(jié)果，這樣很可能導(dǎo)致結(jié)果假陽性。

5.血清學(xué)鑒定是沙門氏菌檢驗(yàn)中的重要鑒定方法。

包括菌體抗原(O)鑒定、鞭毛抗原(H)鑒定和Vi抗原鑒定。血清檢測時(shí)要使用24h內(nèi)的純菌，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)觀察結(jié)果，并做自凝實(shí)驗(yàn)。凝集不好的室溫(不要放冰箱)放置1-2天或者傳代一次再凝集，可能凝集的情況會好些。如果實(shí)驗(yàn)室條件許可建議購置進(jìn)口血清(以泰國和丹麥血清為佳)，如果用國產(chǎn)血清盡量同時(shí)使用兩種廠家產(chǎn)品互相驗(yàn)證。

6.沙門氏菌結(jié)果判定應(yīng)該以生化試驗(yàn)結(jié)果為主并在此基礎(chǔ)上進(jìn)行血清學(xué)判定。

直接用多價(jià)血清進(jìn)行試驗(yàn)而不進(jìn)行生化試驗(yàn)是不可取的。因?yàn)檠鍖W(xué)的原理是抗原抗體結(jié)合，非沙門氏菌的微生物也有可能帶有沙門的類似抗原，這樣的操作可能會導(dǎo)致假陽性因此我們做鑒定的時(shí)候必須先進(jìn)行生化試驗(yàn)，再在生化試驗(yàn)的基礎(chǔ)上進(jìn)行血清學(xué)鑒定。

7.如果我們只需要鑒定某個(gè)菌株是否屬于沙門氏菌，那只需要做O多價(jià)和H多價(jià)血清就可以了(大多數(shù)食源性沙門氏菌凝集A-F群O多價(jià))。

如果要鑒定某個(gè)菌株具體是什么沙門氏菌，那就需要進(jìn)行血清學(xué)分型試驗(yàn)，從多價(jià)血清一直做到O抗原和H抗原的單因子，然后參照《GB 4789.4-2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)沙門氏菌檢驗(yàn)》附錄B的表格查找對應(yīng)的沙門氏菌名。

8.在做血清學(xué)鑒定時(shí)O多價(jià)血清如果沒有凝集并不能直接判定為陰性，因?yàn)檫€要考慮Vi抗原的影響。

Vi抗原屬于K抗原群會阻隔O抗原和相應(yīng)抗體的結(jié)合，所以當(dāng)Vi抗原存在時(shí)，O多價(jià)血清是不會凝集的。因此必須去除Vi抗原的影響。具體方法是挑取菌苔于1ml生理鹽水中做成濃菌液，于酒精燈火焰上煮沸后再檢查如果還是不凝集，才能判定為陰性。

大腸桿菌寄生在我們的腸道中，能減少蛋白質(zhì)分解時(shí)產(chǎn)生的有害物質(zhì)，很長一段時(shí)間都被認(rèn)為是有益的細(xì)菌，但是隨著深入的研究，我們發(fā)現(xiàn)有的大腸桿菌對人和其他動物是有害的，我們稱之為致病性的大腸桿菌。

大腸桿菌對我們來說并不陌生，當(dāng)我們出生的那一刻，大腸桿菌就隨著母乳進(jìn)入了我們的體內(nèi)，大腸桿菌在正常的棲居條件下是不會致病的，而且，還會幫我們減少蛋白質(zhì)分解所產(chǎn)生的有害物質(zhì)，但是這位棲居者有時(shí)也會變成一枚炸彈，當(dāng)我們不注意飲食、生活衛(wèi)生時(shí)，它就會給我們帶來疾病，總之，這位伙伴成為了我們一生不可缺少的，讓我們更好地了解它，走近它，在有限的生命中與它好好相處。

大腸桿菌的發(fā)現(xiàn)腸埃希氏菌(E.coli)通常稱為大腸桿菌，是Escherich在1885年發(fā)現(xiàn)的，在相當(dāng)長的一段時(shí)間內(nèi)，一直被當(dāng)作正常腸道菌群的組成部分，是非致病性的。直到20世紀(jì)中葉，才認(rèn)識到一些特殊血清型的大腸桿菌對人和動物有病原性，尤其對嬰兒和幼畜、禽。常引起嚴(yán)重腹瀉和敗血癥，根據(jù)不同的生物學(xué)特性將致病性大腸桿菌分為5類，致病性大腸桿菌(EPEC)、腸產(chǎn)毒性大腸桿菌(ETEC)、腸侵襲性大腸桿菌(EIEC)、腸出血性大腸桿菌(EHEC)、腸黏附性大腸桿菌(EAEC)。大腸桿菌屬于細(xì)菌。