大腸菌群是世界上大多數(shù)國家和組織評價食品衛(wèi)生質量的重要安全性指標之一。因與腸道致病菌有密切的相關性,大腸菌群在食品微生物指標體系中占有重要地位,被稱為糞便污染指示菌。
因此,對于食品檢驗檢測行業(yè)從業(yè)人員來說,大腸菌群的檢驗是必備的一項技能。若吃下大腸菌群超標的食物,可能出現(xiàn)腹瀉、腹痛、嘔吐等癥狀,引發(fā)腸炎、腸道出血等疾病,嚴重者甚至出現(xiàn)感染性休克,引發(fā)腸道嚴重感染,進而帶來臟器功能障礙。
那么,如何準確地檢驗食品中是否含有大腸菌群呢?今天,就手把手教你,快速搞定大腸菌群的檢驗!
首先,給大家科普下大腸菌群的特性。大腸菌群是革蘭氏陰性菌,不形成芽孢,需氧或兼性厭氧,在35攝氏度條件下培養(yǎng)48h發(fā)酵乳糖產酸產氣,敲黑板劃重點啦,正是大腸菌群分解乳糖產酸產氣的特性,才能將其從眾多的微生物中分離出來。
大腸菌群是一個統(tǒng)稱,包括大腸埃希氏菌屬、克雷伯氏菌屬、腸桿菌屬、檸檬酸桿菌屬、沙雷氏菌屬。雖包含眾多菌屬,但大腸菌群具有相同的生理特點,即使數(shù)量較少,仍可進行相對容易和可靠的檢測,今天要給大家分享的大腸菌群的檢測方法為MPN(Most Probable Number)法,是目前檢測大腸菌群和大腸桿菌的一種常用方法。
貼心提醒,MPN采用統(tǒng)計學的方法,通過稀釋培養(yǎng)計數(shù),經一系列復雜的運算,估算出具有共同特性的一類微生物在食品中存在的概率。
為方便大家使用和觀看,為大家總結MPN法檢驗大腸菌群的流程如下:
為保證實驗結果的可靠性,大腸菌群檢驗過程中又有哪些注意事項呢?
1:檢樣時注意無菌操作;
2:稀釋時采用的稀釋液可以用磷酸鹽緩沖液或生理鹽水,接種時可采用九管法,設置三個梯度,分別為0.1g/mL、0.01g/mL、0.001g/mL,每一個稀釋度的試管應充分混勻;
3:每次實驗需要有陰性對照;
4:使用小倒管培養(yǎng)基配制時,為排凈氣泡,滅菌時不要把試管的蓋子蓋的太緊,滅菌后注意觀察一下倒管中的氣體是否排完全;
5:高壓滅菌后,等高壓滅菌鍋的壓力表達到0,取出培養(yǎng)基放到冰箱冷卻,效果會比較好;
6:在實際工作中,大腸菌群的產氣量不同,有時倒管中充滿氣體,有時倒管中只有非常少的氣體(類似小米粒的氣泡),這時可以輕輕搖晃試管,如有氣泡沿管壁快速上浮,應考慮可能有氣體產生。